肉的宰后嫩化主耍归因于肌原玻纤成分类型的破环，肌原玻纤成分类型是由内源性球血清质油脂淀粉水解酶生物光降解肌原玻纤和血组织上皮神经元骨架球血清质从而造成的。与几十块年来一支是注意聚焦点的钙球血清质酶其他，胱天球血清质酶（caspases）最近几天拥有感的兴趣时题。胱天球血清质酶在血组织上皮神经元凋亡的执行命令周期起着至关意义重大的影响，这之中caspase-3在生前球血清质油脂淀粉水解中的影响是一定要多方位面和繁复的，因而值得买进一点调查。S-亚硝基化利用转换钙脱离、力量分解、球血清质质生物光降解和血组织上皮神经元凋亡来转换吃起来，以及嫩度和持水能力素质。现已调查看见S-亚硝基化都可以调低忽略线粒体的caspase-3级联影响，这能够是身体肌肉血组织上皮神经元凋亡和牛羊肉品质质量的变化的因素。caspase-3的调查重心是其与血组织上皮神经元凋亡的相互关系，然后，越来越多有调查探究S-亚硝基化转换caspase-3的制度。

2024年9月由无锡林果大家张万刚硕士生导师组织在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱菌物为该研究提供了亚硝基化淡化组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

常常副标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

刊物：Journal of Agricultural and Food Chemistry

202几年印象细胞因子：5.7

发过周期：2024年9月

客的单位：南京农业大学

设计的原材料：蛋白

拜谱保证技巧：亚硝基化修饰组学

技艺自驾路线：

一、研发結果

01.Caspase-3催化活性

现在尚不清析NO对caspase-3的抑止做用需不需要归因于NO介导的S-亚硝基化，不一样的溶度系数的GSNO做外源性NO出售，以诱骗caspase-3的身体S-亚硝基化。数据证实，与没了GSNO的组较之，100、200和400μM GSNO组的caspase-3活性氧酶相关性影响（图1），与之前新闻稿完全一致。GSNO正确处理影响caspase-3活性氧酶的自身病因仍亟需确立。

图1 各不相同渗透压的GSNO外理对caspase-3活力的影响到

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化状态

探究Caspase-3的亚硝基化度，以阐释GSNO对Caspase-3的生理反应性。经GSNO外理后，检查测量到caspase-3血清S-亚硝基化刚度曾加（图2）。这么多成果取决于，外源性GSNO培養可成就 引导caspase-3的体内S-亚硝基化。令人感动惊喜的是，在不有着GSNO有着的對照组中检查测量到是一个暗淡的S-亚硝基化带，这取决于caspase-3能够发生了内源性的S-亚硝基化。因此，本探究中caspase-3的S-亚硝基化度较高，而caspase-3的活力降低了，这与之后的探究不一样。只不过，caspase-3的特情人S-亚硝基化绘制位点尚不知晓，还需求进几步的探究。

图2 GSNO整理对caspase-3S-亚硝基化层次的直接影响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化装饰组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的编码回文序列。蓝色的标志的编码回文序列写出S-亚硝基化肽，紫色标志的C写出S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱分析

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3吸附结血清

结淀粉酶作属于关键性性的人体癌细胞骨架淀粉酶，在稳定肌人体癌细胞架构的架构完善性和收缩毛孔性领域起着重于要性用处，钻研S-亚硝基化caspase-3对结淀粉酶挥发的皮肤辨别力认识享有关键性性目的意义。与Std（未用胱天淀粉酶酶-3和GSNO孵育的初始值肌合成纤维素淀粉酶）组不同之处，0 μM GSNO组（肌原合成纤维素和caspase-3的孵育，无GSNO）的完善结淀粉酶含碳量有比较突出下降，表示caspase-3对结淀粉酶享有自身的淀粉酶电离专业能力。在GSNO孵育后，完善结淀粉酶的含碳量比较突出加入（P < 0.05）。最后，当GSNO溶度增加时，完善结淀粉酶的含碳量不断上涨（P < 0.05）（图5）。这个感觉发现，SNO掩盖的caspase-3以技术水平信任的的方法仰制结淀粉酶的挥发。

图5.S-亚硝基化caspase-3吸附结蛋清

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3分解肌钙核蛋白-T

肌钙核淀粉酶质-T (TnT)是原肌球核淀粉酶质调结责任胸肌伸缩的细条的必要肌原弹性仟维核淀粉酶质。TnT的可吸附优点是检查测量到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化状态下，caspase-3对TnT的可吸附实际情况如同6如下，与Std组（中含caspase-3和GSNO的肌原弹性仟维）相较于，caspase-3组中30 kDa TnT细节描写有很深加剧，反映出caspase-3进行了TnT的可吸附，不仅如此，caspase-3与GSNO的孵育干扰30 kDa TnT下跌。在100和200 μM GSNO组之前没了检查测量到很深的一定的差异(P > 0.05)，而当GSNO的渗透压实现400 μM 时，该细节描写有很深缩短(P < 0.05)。这类找到反映出了SNO绘制的caspase-3对TnT可吸附的仰定制用。结核淀粉酶质和TnT是caspase-3的的敏感底物，而GSNO正确处理大大减少caspase-3的生物也许 干扰肌原弹性仟维核淀粉酶质可吸附层面大大减少。与此同时根据上述，NO促进的S-亚硝基化行用绘制半胱氨酸残基来调结caspase-3的生物，因此进步骤干扰其对结核淀粉酶质和TnT的核淀粉酶质蛋白质水解技能，于是干扰牛肉片品格。

图6. S-亚硝基化caspase- 3挥发肌钙蛋白酶-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结

本探析我委浅论S-亚硝基化对caspase-3表达的危害下列关于很快对鸡肉肌原食物纤维棉身体外降解塑料的危害。淀粉酶质S-亚硝基化还可以表达caspase-3的半胱氨酸残基，而造成caspase-3可溶性影响，进步骤抑制作用了其对鸡肉肌原食物纤维棉淀粉酶质的淀粉酶质水解反应实力。

三、拜谱个人总结

探究用了酶活判断，亚硝基化掩盖组学讲解，WB等判断伎俩，表明血清S-亚硝基化都可以掩盖caspase-3的半胱氨酸残基，这以至于了caspase-3可溶性的缩减，并举一歩减弱了其对羊肉肌原植物纤维血清的血清电离技能。本探究为描述血清质亚硝基化对吃起来的改善体系出示新一个新的视域。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清酶质组学、掩盖血清酶质组学、分解代谢组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸款型產品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺过酸、total氧化的恢复、游走巯基，欢迎大家咨询！

分类论文资料：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663